简介
《生物化学实验教程》是在西北民族大学生命科学与工程学院的《生物化学实验指导》讲义基础上.吸取多年的教学、科研的经验和广大学生的建议编写而成,并补充了许多新的实验内容,便于学生学习。同时整理了有关“常用仪器使用”、“缓冲溶液的配制”、“层析法常用数据”、“常用试剂的配制”、“生物化学与分子生物学专业常用数据库”等内容。《生物化学实验教程》要求学生学会蛋白类、糖类、脂类、核酸、氨基酸、酶和维生素的分离提取,定量测定或定性鉴定等方法:掌握电泳、层析、离心和光谱法检测等技术,从而培养学生综合性实践创新的能力。
目录
第一篇 生物化学实验基本技能和基础知识
第一章 生物化学实验基本技能/002
第一节 生物化学实验须知/002
第二节 生物化学实验基本操作/007
第三节 溶液的配制/024
第四节 实验误差与数据处理/033
第五节 实验样品的制备/038
第二章 主要生物物质分析/040
第一节 碳水化合物分析/040
第二节 核酸分析/043
第三节 蛋白质分析/045
第二篇 生物化学实验技术基本原理
第一章 紫外一可见吸收光谱分析/051
第一节 光谱分析概述/051
第二节 紫外一可见吸收光谱分析/056
第二章 层析技术基本原理/065
第一节 层析技术分类/065
第二节 吸附层析/067
第三节 分配层析/074
第四节 凝胶层析/078
第五节 离子交换层析/081
第六节 亲和层析/086
第七节 薄层层析/087
第三章 电泳技术基本原理/090
第一节 电泳技术概述/090
第二节 醋酸纤维素薄膜电泳/092
第三节 琼脂糖凝胶电泳/093
第四节 聚丙烯酰胺凝胶电泳/095
第四章 离心技术/105
第一节 离心技术基本原理/105
第二节 离心机的主要构造和类型/106
第三节 制备性超速离心的分离方法/109
第四节 离心机操作的注意事项/110
第五章 膜处理技术基本原理/112
第一节 过滤技术/112
第二节 膜分离技术/113
第三节 超滤技术/114
第六章 生物大分子的制备/119
第一节 生物化学实验常用的生物材料/119
第二节 生物大分子的制备/120
第三篇 实验部分
第一章 基础实验/135
实验一 缓冲溶液的配制及pH值的测定/135
实验二 分光光度计线性分辨范围的测定/138
实验三 总糖和还原糖的测定——3,5-二硝基水杨酸法/140
实验四 血糖含量的测定——邻甲苯胺法/143
实验五 肝糖原的提取与鉴定/145
实验六 饱食、饥饿及激素对肝糖原含量的影响/147
实验七 直链淀粉和支链淀粉的测定——双波长法/149
实验八 粗纤维的测定——酸性洗涤剂法/151
实验九 黏多糖-肝素钠效价的测定/153
实验十 可溶性糖的硅胶G薄层层析/154
实验十一 粗脂肪含量的测定——索氏抽提法/157
实验十二 血清脂类的快速测定/159
实验十三 蛋白质等电点的测定/163
实验十四 蛋白质的沉淀及颜色反应/164
实验十五 微量凯氏定氮法测定蛋白质含量/170
实验十六 双缩脲法测定蛋白质含量/173
实验十七 Folin-酚法测定蛋白质含量——Lowry法/175
实验十八 紫外分光光度法测定蛋白质含量/177
实验十九 考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量——Bradford法/178
实验二十 BCA法测定蛋白质含量/180
实验二十一 RNA与DNA的测定/183
实验二十二 紫外吸收法测定DNA的含量/185
实验二十三 维生素A的提取及含量测定/188
实验二十四 维生素C含量的定量测定——2,6-二氯酚靛酚滴定法/190
实验二十五 酶的特性/192
实验二十六 蛋白质的制备——牛奶中提取酪蛋白/196
实验二十七 氨基酸的分离鉴定——纸层析法/197
实验二十八 氨基氮含量的测定——甲醛滴定法/199
第二章 技术性实验/202
实验二十九 蛋白质的盐析及透析/202
实验三十 血清白蛋白的分离纯化/204
实验三十一 溶菌酶结晶的制备及活力测定/207
实验三十二 离子交换层析法分离氨基酸/210
实验三十三 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白/212
实验三十四 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白/215
实验三十五 SDS-PAGE电泳测定蛋白质相对分子质量/218
实验三十六 测定蛋白质的相对分子质量——葡聚糖凝胶过滤法/221
实验三十七 等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点/225
实验三十八 脲酶的动力学研究/229
实验三十九 酵母蔗糖酶的纯化及性质研究/234
实验四十 蛋白质印迹(Western Blotting)/240
实验四十一 核酸的琼脂糖凝胶电泳/246
实验四十二 用正交法测定几种因素对酶活性的影响/250
第三章 综合实验/254
实验四十三 纤维素酶活力的测定/254
实验四十四 卵磷脂的提取、纯化和鉴定/259
实验四十五 胰蛋白酶的提取、纯化及活力测定/262
实验四十六 基因组DNA的提取/267
实验四十七 血液中乳酸脱氢酶聚丙烯酰胺凝胶电泳分析——垂直平板不连续电泳法/270
实验四十八 蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定/277
第四篇 附录
附录A 生物化学实验常用词中英文对照/282
附录B 常用元素的相对原子质量表/284
附录C 洗涤液的种类和配制方法/285
附录D 常用化学试剂/286
附录E 硫酸铵饱和度常用表/289
附录F 计算近似RCF的列线图/291
附录G 常用缓冲溶液的配制/291
附录H 一些常见蛋白质相对分子质量参考值/299
附录I 一些常见蛋白质等电点参考值/300
附录J 常用化学物质相对分子质量/301
附录K 层析法常用数据/303
附录L 生物化学与分子生物学专业常用数据库简介/317
参考文献/319
第一章 生物化学实验基本技能/002
第一节 生物化学实验须知/002
第二节 生物化学实验基本操作/007
第三节 溶液的配制/024
第四节 实验误差与数据处理/033
第五节 实验样品的制备/038
第二章 主要生物物质分析/040
第一节 碳水化合物分析/040
第二节 核酸分析/043
第三节 蛋白质分析/045
第二篇 生物化学实验技术基本原理
第一章 紫外一可见吸收光谱分析/051
第一节 光谱分析概述/051
第二节 紫外一可见吸收光谱分析/056
第二章 层析技术基本原理/065
第一节 层析技术分类/065
第二节 吸附层析/067
第三节 分配层析/074
第四节 凝胶层析/078
第五节 离子交换层析/081
第六节 亲和层析/086
第七节 薄层层析/087
第三章 电泳技术基本原理/090
第一节 电泳技术概述/090
第二节 醋酸纤维素薄膜电泳/092
第三节 琼脂糖凝胶电泳/093
第四节 聚丙烯酰胺凝胶电泳/095
第四章 离心技术/105
第一节 离心技术基本原理/105
第二节 离心机的主要构造和类型/106
第三节 制备性超速离心的分离方法/109
第四节 离心机操作的注意事项/110
第五章 膜处理技术基本原理/112
第一节 过滤技术/112
第二节 膜分离技术/113
第三节 超滤技术/114
第六章 生物大分子的制备/119
第一节 生物化学实验常用的生物材料/119
第二节 生物大分子的制备/120
第三篇 实验部分
第一章 基础实验/135
实验一 缓冲溶液的配制及pH值的测定/135
实验二 分光光度计线性分辨范围的测定/138
实验三 总糖和还原糖的测定——3,5-二硝基水杨酸法/140
实验四 血糖含量的测定——邻甲苯胺法/143
实验五 肝糖原的提取与鉴定/145
实验六 饱食、饥饿及激素对肝糖原含量的影响/147
实验七 直链淀粉和支链淀粉的测定——双波长法/149
实验八 粗纤维的测定——酸性洗涤剂法/151
实验九 黏多糖-肝素钠效价的测定/153
实验十 可溶性糖的硅胶G薄层层析/154
实验十一 粗脂肪含量的测定——索氏抽提法/157
实验十二 血清脂类的快速测定/159
实验十三 蛋白质等电点的测定/163
实验十四 蛋白质的沉淀及颜色反应/164
实验十五 微量凯氏定氮法测定蛋白质含量/170
实验十六 双缩脲法测定蛋白质含量/173
实验十七 Folin-酚法测定蛋白质含量——Lowry法/175
实验十八 紫外分光光度法测定蛋白质含量/177
实验十九 考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量——Bradford法/178
实验二十 BCA法测定蛋白质含量/180
实验二十一 RNA与DNA的测定/183
实验二十二 紫外吸收法测定DNA的含量/185
实验二十三 维生素A的提取及含量测定/188
实验二十四 维生素C含量的定量测定——2,6-二氯酚靛酚滴定法/190
实验二十五 酶的特性/192
实验二十六 蛋白质的制备——牛奶中提取酪蛋白/196
实验二十七 氨基酸的分离鉴定——纸层析法/197
实验二十八 氨基氮含量的测定——甲醛滴定法/199
第二章 技术性实验/202
实验二十九 蛋白质的盐析及透析/202
实验三十 血清白蛋白的分离纯化/204
实验三十一 溶菌酶结晶的制备及活力测定/207
实验三十二 离子交换层析法分离氨基酸/210
实验三十三 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白/212
实验三十四 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白/215
实验三十五 SDS-PAGE电泳测定蛋白质相对分子质量/218
实验三十六 测定蛋白质的相对分子质量——葡聚糖凝胶过滤法/221
实验三十七 等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点/225
实验三十八 脲酶的动力学研究/229
实验三十九 酵母蔗糖酶的纯化及性质研究/234
实验四十 蛋白质印迹(Western Blotting)/240
实验四十一 核酸的琼脂糖凝胶电泳/246
实验四十二 用正交法测定几种因素对酶活性的影响/250
第三章 综合实验/254
实验四十三 纤维素酶活力的测定/254
实验四十四 卵磷脂的提取、纯化和鉴定/259
实验四十五 胰蛋白酶的提取、纯化及活力测定/262
实验四十六 基因组DNA的提取/267
实验四十七 血液中乳酸脱氢酶聚丙烯酰胺凝胶电泳分析——垂直平板不连续电泳法/270
实验四十八 蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定/277
第四篇 附录
附录A 生物化学实验常用词中英文对照/282
附录B 常用元素的相对原子质量表/284
附录C 洗涤液的种类和配制方法/285
附录D 常用化学试剂/286
附录E 硫酸铵饱和度常用表/289
附录F 计算近似RCF的列线图/291
附录G 常用缓冲溶液的配制/291
附录H 一些常见蛋白质相对分子质量参考值/299
附录I 一些常见蛋白质等电点参考值/300
附录J 常用化学物质相对分子质量/301
附录K 层析法常用数据/303
附录L 生物化学与分子生物学专业常用数据库简介/317
参考文献/319
生物化学实验教程
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