Research on bacterial laccase

第1章　绪论
1.1　研究背景
1.1.1　研究的目的和意义
1.1.2　研究内容及创新点
1.2　漆酶的研究概况
1.2.1　漆酶的来源、种类及分布
1.2.2　漆酶的结构、特性及其作用机理
1.2.3　漆酶的应用
1.3　细菌漆酶研究概况
1.3.1　产漆酶细菌的种类
1.3.2　产漆酶细菌筛选方法进展
1.3.3　细菌漆酶酶学性质的研究方法进展
1.3.4　细菌漆酶应用的研究进展
1.4　细菌漆酶的分子生物学研究进展
1.5　固定化酶技术
1.5.1　固定化酶的定义
1.5.2　固定化酶的优点
1.5.3　酶的固定化方法
1.5.4　固定化酶的应用
1.6　大肠杆菌表达系统
1.6.1　大肠杆菌表达系统特点
1.6.2　表达系统的构成
1.6.3　重组基因的表达特点
1.6.4　蛋白质表达部位
第2章　产漆酶细菌的筛选与鉴定
2.1　实验材料与仪器
2.1.1　材料
2.1.2　试剂
2.1.3　仪器
2.1.4　试剂配制及培养基
2.2　实验方法
2.2.1　筛选方法
2.2.2　形态特性研究
2.2.3　生理生化特性研究
2.2.4　16S rDNA鉴定
2.3　结果与分析
2.3.1　高产漆酶菌株的分离
2.3.2　形态及生理生化特性
2.3.3　分子生物学鉴定
2.4　讨论
2.5　小结
第3章　B.subtilis WD23的生物学及其酶学性质研究
3.1　实验材料与仪器
3.1.1　材料
3.1.2　试剂与培养基
3.1.3　仪器
3.2　实验方法
3.2.1　B.subtilis WD23的生物学特性
3.2.2　粗提液的制备与酶活测定
3.2.3　细菌芽孢漆酶酶学性质研究
3.2.4　细菌芽孢漆酶对染料的脱色实验
3.3　结果与分析
3.3.1　B.subtilis WD23的生物学特性
3.3.2　产芽孢率与细菌漆酶活性的关系
3.3.3　细菌芽孢漆酶酶学性质研究
3.3.4　细菌芽孢漆酶对染料的脱色实验
3.4　讨论
3.5　小结
第4章　细菌芽孢漆酶的固定化及其应用
4.1　实验材料
4.1.1 菌株
4.1.2　试剂与培养基
4.1.3　仪器
4.2　实验方法
4.2.1 固定化细菌芽孢漆酶微胶囊的制备
4.2.2　微胶囊性能测定方法
4.2.3　芽孢漆酶酶活测定方法
4.2.4　固定化芽孢漆酶酶学性质
4.2.5　造纸废水黑液的降解试验
4.3　结果与分析
4.3.1　微胶囊性能测定
4.3.2　固定化芽孢漆酶酶学性质
4.3.3　造纸废水黑液的降解试验
4.4　讨论
4.5　小结
第5章　B.subtilis WD23的CotA基因的克隆与异源表达
5.1　材料
5.1.1　菌株
5.1.2　试剂
5.1.3　仪器
5.1.4　试剂配制及培养基
5.2　实验方法
5.2.1　B.subtilis CotA基因的克隆
5.2.2　pET22b/CotA重组表达载体的构建及鉴定
5.2.3　CotA重组蛋白的诱导表达条件的优化
5.3　结果与分析
5.3.1　CotA基因的PCR扩增
5.3.2　重组质粒pMD18-T/CotA的构建及鉴定
5.3.3　pET22b/CotA重组表达载体的构建及鉴定
5.3.4　CotA重组蛋白的诱导表达条件的优化
5.4　讨论
5.5　小结
第6章　CotA蛋白的纯化及其酶学特性的研究
6.1　实验材料
6.1.1 菌种
6.1.2　试剂
6.1.3　仪器
6.1.4　试剂配制
6.2　实验方法
6.2.1　CotA蛋白的纯化
6.2.2　CotA漆酶酶学性质的研究
6.2.3　CotA漆酶对染料的脱色实验
6.3　结果与分析
6.3.1　CotA蛋白的纯化
6.3.2　CotA漆酶酶学性质的研究
6.3.3　CotA漆酶对染料的脱色实验
6.4　讨论
6.5　小结
结论
参考文献