Guide to protein purification

撰稿人
序言
1.为什么需要纯化酶？
第一部分 建立纯化程序
2.蛋白质纯化的策略和思路
1.总体思路
2.蛋白质来源
3.提取
4.批量纯化的步骤
5.纯化的精制步骤
6.结论
参考文献
3.生物信息学在蛋白质纯化方案设计中的应用
1.从氨基酸序列中可以了解到什么
2.仍不能预测到的是什么
3.结论
参考文献
4.制作一张蛋白质纯化的汇总表
1.引言
2.脚注的重要性
3.SDS聚丙烯酰胺凝胶分析对于主要蛋白质组分的价值
4.常见的错误和问题
第二部分 处理蛋白质和酶的常规方法
5.建立一个实验室
1.支撑材料
2.分析检测的必要条件
3.蛋白质分级的必要条件
6.缓冲液：原理和操作
1.引言
2.理论
3.缓冲液的选择
4.缓冲液的准备
5.挥发性缓冲液
6.宽范围的缓冲液
7.缓冲液储备液的配制
参考文献
7.酶活的测定
1.引言
2.催化活性的原理
3.酶活性的测定
4.反应分析混合物的配方设计
5.讨论
致谢
参考文献
8.蛋白质定量
1.引言
2.准备试剂的说明
3.紫外光谱吸收方法
4.染料染色蛋白质分析
5.考马斯亮蓝蛋白质检测法（Bradford法）（范围：1-50ug）
6.Lowry检测法（Alkaline Copper还原法）（范围：5-100ug）
7.二喹啉甲酸检测法（BCA法）（范围：0.2 -50ug）
8.胺衍生法（范围：0.05-25ug）
9.基于去垢剂的荧光检测法（范围：0.02-2ug）
10.总论
致谢
参考文献
9.蛋白质浓缩和其他溶解物的去除
1.层析
2.电泳
3.透析
4.超滤
5.冷冻干燥
6.沉淀
7.结晶
参考文献
10.蛋白质稳定性的保持
1.蛋白质失活的原因
2.常规处理方法
3.浓缩和溶解条件
4.稳定性试验和储藏条件
……
第三部分 重组蛋白质的表达和纯化
第四部分 提取物和亚细胞组分的分离
第五部分 纯化步骤：批量法
第六部分 纯化步骤：层析法
第七部分 纯化步骤：亲和法
第八部分 纯化步骤：电泳法
第九部分 膜蛋白和糖蛋白的纯化程序
第十部分 纯化蛋白质的特性
第十一部分 其他技术
第十二部分 结束语
撰稿人索引
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