大豆光周期和赤霉素开花信号传导基因功能研究

第一章 引言
1.1 大豆光周期现象的研究进展
1.1.1 大豆生育期性状的光周期反应特性
1.1.2 光周期对大豆农艺性状和籽粒品质的影响
1.1.3 大豆中光敏感性E等位基因及光周期基因的研究进展
1.1.4 大豆开花时间基因图谱的绘制
1.2拟南芥开花诱导的分子生物学研究进展
1.2.1 光周期途径
1.2.2 春化促进途径
1.2.3 自主途径
1.2.4 赤霉素途径
1.2.5 染色质结构和开花抑制
1.2.6 拟南芥开花途径的整合
1.2.7 植物中的拟南芥开花途径的基因保守性
1.3 赤霉素与植物生长发育相关研究进展
1.3.1 赤霉素在植物生长发育中的作用
1.3.2 GA的生物合成途径和信号转导途径
1.4 SKIP／SNW转录因子研究进展
1.5研究目的和意义
第二章材料和方法
2.1实验材料和试剂
2.1.1 植物材料
2.1.2 菌种及载体
2.1.3 主要试剂
2.2实验方法
2.2.1 RACE方法克隆大豆GmGBP1基因
2.2.2 实时荧光定量Real—timeRT—PCR分析GmGBPl的表达
2.2.3植物表达载体pBI121一GmGBP1的构建
2.2.4 农杆菌介导法转化烟草叶盘
2.2.5 转GmGBP1基因烟草T3及后代功能分析
2.2.6 GmGBPl基因亚细胞定位
第三章结果与分析
3.1大豆GmGBPl基因克隆
3.1.1 大豆总RNA的提取
3.1.2 大豆GmGBP1基因5′RACE和3′RACE克隆
3.1.3 大豆GmGBP1基因全长序列的生物信息学及系统进化分析
3.1.4 GmGBP1全长基因组DNA序列的获得
3.2大豆GmGBPl基因表达研究
3.2.1 大豆叶片中GmGBP1基因在LD和SD条件下基因表达
3.2.2 GmGBP1基因在LD和SD条件下的昼夜节律表达分析
3.2.3 GmGBP1基因在不同时间过程中的表达分析
3.2.4 GmGBP1基因组织特异性表达分析
3.2.5 植物生长调节剂及热压对GmGBP1基因表达影响分析
3.3植物表达载体pBI121一GmGBP1的构建
3.4烟草的遗传转化
3.4.1 丛生芽和根的诱导
3.4.2 转基因烟草的PCR检测
3.4.3 转基因烟草的PCR—Southern检测
3.4.4 转基因烟草的RT—PCR检测
3.5转GmGBP1基因烟草功能分析
3.5.1 转基因烟草的T3代表型观察
3.5.2 转基因烟草T4代LD和SD下表型观察
3.5.3 半定量RT—PCR分析烟草NtCO基因在LD和SD下烟草中表达
3.5.4 烟草茎扫描电镜观察
3.5.5 GA3对转基因烟草生长及基因表达的影响
3.5.6 ABA对转基因烟草生长的影响
3.5.7 NaCl和甘露醇对转基因烟草生长的影响
3.5.8 热对转基因烟草生长的影响
3.5.9 GmGBP1基因表达的洋葱表皮亚细胞定位
第四章讨论
4.1 GmGBP1，SKIP／SNW同系物为光周期信号通路中新的正调节子，通过调节CO表达促进开花
4.2 GA诱导GmGBP1表达，GmGBP1—ox烟草表现出增加的GA效应
4.3 GmGBP1正向调节热压耐受性
第五章结论
附录1 溶液的配制
附录2 培养基的配制
附录3 实验用抗生素
参考文献