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简介
本书以现代分子生物学研究的思路为线索，将多种常用的实验技术分五部分进行介绍，主要介绍了进行分子生物学实验之前必须掌握的实验室规则、安全常识及基本操作；并以分子克隆的流程为序分别介绍了目的基因的获取、目的基因与载体的连接以及重组DNA他子的鉴定等。
目录
目录
第一部分 实验须知
第二部分 DNA重组实验
第一章 目的基因的获取
实验一 组织细胞中基因组DNA的提取
实验二 组织细胞中RNA的提取及cDNA的合成
实验三 核酸分子的定量
实验四 聚合酶链式反应扩增目的基因
第二章 目的基因与载体的重组
实验五 限制性核酸内切酶对DNA进行酶切
实验六 电泳分离DNA片段
实验七 DNA片段的回收与纯化
实验八 目的基因与载体片段的连接
第三章 重组DNA的筛选与扩增
实验九 感受态细胞的制备
实验十 重组DNA的转化与筛选
实验十一 重组质粒的提取与鉴定
第三部分 重组DNA的表达
第一章 在大肠杆菌中表达重组蛋白
实验十二 温度诱导表达
实验十三 化学诱导表达
第二章 蛋白质表达产物的鉴定
实验十四 细菌裂解与蛋白质表达产物的电泳鉴定
实验十五 蛋白质表达产物的分离
实验十六 蛋白质表达产物的定量
第三章 在哺乳动物细胞中表达重组DNA
实验十七 重组DNA转染哺乳动物细胞
实验十八 细胞裂解与免疫沉淀
实验十九 蛋白质印记技术
第四部分 核酸分子杂交
第一章 核酸探针的标记
实验二十 切口平移法
实验二十一 随机引物法
实验二十二 DNA探针的末端标记
第二章 核酸分子杂交
实验二十三 Southern印迹杂交
实验二十四 Northern印迹杂交
实验二十五 原位杂交
第五部分 生物信息学在分子生物学实验中的应用
实验二十六 网上生物学资源的利用
实验二十七 序列的数据库查询
实验二十八 序列的相似性分析
实验二十九 软件分析开放读框及预测二级结构
附录一 医学分子生物学实验常用参数
附录二 常用试剂的配制
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第一部分 实验须知
第二部分 DNA重组实验
第一章 目的基因的获取
实验一 组织细胞中基因组DNA的提取
实验二 组织细胞中RNA的提取及cDNA的合成
实验三 核酸分子的定量
实验四 聚合酶链式反应扩增目的基因
第二章 目的基因与载体的重组
实验五 限制性核酸内切酶对DNA进行酶切
实验六 电泳分离DNA片段
实验七 DNA片段的回收与纯化
实验八 目的基因与载体片段的连接
第三章 重组DNA的筛选与扩增
实验九 感受态细胞的制备
实验十 重组DNA的转化与筛选
实验十一 重组质粒的提取与鉴定
第三部分 重组DNA的表达
第一章 在大肠杆菌中表达重组蛋白
实验十二 温度诱导表达
实验十三 化学诱导表达
第二章 蛋白质表达产物的鉴定
实验十四 细菌裂解与蛋白质表达产物的电泳鉴定
实验十五 蛋白质表达产物的分离
实验十六 蛋白质表达产物的定量
第三章 在哺乳动物细胞中表达重组DNA
实验十七 重组DNA转染哺乳动物细胞
实验十八 细胞裂解与免疫沉淀
实验十九 蛋白质印记技术
第四部分 核酸分子杂交
第一章 核酸探针的标记
实验二十 切口平移法
实验二十一 随机引物法
实验二十二 DNA探针的末端标记
第二章 核酸分子杂交
实验二十三 Southern印迹杂交
实验二十四 Northern印迹杂交
实验二十五 原位杂交
第五部分 生物信息学在分子生物学实验中的应用
实验二十六 网上生物学资源的利用
实验二十七 序列的数据库查询
实验二十八 序列的相似性分析
实验二十九 软件分析开放读框及预测二级结构
附录一 医学分子生物学实验常用参数
附录二 常用试剂的配制
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医学分子生物学实验指导
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