简介
本书读者对象是高等医药院校及研究机构的硕士和博士研究生以及相关的研究人员。2002年出版的《医学分子生物学实验技术》,受到了广大师生的欢迎。随着分子生物学研究技术的发展和我国医药院校研究工作的进展,原有内容已不能适应当前需求。第2版将力争反映当前分子生物学技术的发展,为研究生的课题研究提供最新的技术参考。新版本更加突出了研究生教学特点和课题研究方向,强调基本技术与进展、广度与深度并重。与第1版相比,增加了基因体外突变、蛋白化学修饰、基因表达调控、小RNA研究等4章新的内容,较全面反映了近几年医学院校分子生物学课题研究的需求。另外,针对研究生课题研究,进一步强调了可操作性。为此,在一些章节中分别根据需要增加了设计思路、操作注意事项、常见问题及解决方案等新内容,对于研究生的课题研究更具指导性。在附录中增加了分子生物学实验微量操作、常见实验设计错误等,这些新的内容相信对于研究生更快适应实验室会有所帮助。
目录
绪论
第一章 聚合酶链反应
第一节 PCR技术概述
第二节 PCR的引物设计和条件优化
第三节 PCR产物的鉴定方法
第四节 PCR的基本类型及应用
第五节 实时定量PCR
第二章 DNA体外重组
第一节 DNA体外重组的基本流程
第二节 载体的选择及准备
第三节 目的DNA片段的获取
第四节 DNA片段与载体的连接
第五节 重组DNA转化宿丰细胞
第六节 重组DNA的克隆筛选及鉴定
第三章 DNA序列分析技术
第一节 常规DNA序列测定的原理
第二节 自动激光荧光DNA测序――第一代测序技术
第三节 其他DNA序列分析新技术
第四章 基因突变技术
第一节 体外基因突变和鉴定
第二节 细胞和动物的基因诱变和鉴定
第五章 核酸分子杂交
第一节 核酸探针及其标记
第二节 Southem印迹杂交
第三节 Northem印迹杂交
第四节 其他核酸分子杂交
第六章 外源基因在原核细胞的表达
第一节 常用表达系统及其选择
第二节 外源基因的表达和鉴定
第三节 外源基因表达条件和优化
第四节 外源基因原核表达的基本操作
第七章 外源基因在真核细胞中的表达
第一节 真核表达载体及宿主
第二节 真核细胞基因导入方法
第三节 外源基因在酵母细胞中的表达
第四节 外源基因在昆虫细胞中的表达
第五节 外源基因在哺乳动物细胞中的表达
第八章 蛋白质的分离纯化
第一节 蛋白质分离纯化的基本原则
第二节 生物样品的预处理
第三节 蛋白质样品的粗分离
第四节 蛋白质的层析纯化
第五节 蛋白质的电泳分离和鉴定
第六节 纯化蛋白质的后期处理
第七节 蛋白质分离纯化的综合策略
第九章 蛋白质的定性定量分析
第一节 蛋白质分子量的测定
第二节 蛋门质的等电点测定
第三节 蛋白质总含量测定
第四节 特定蛋白质的含量测定
第五节 蛋白质半衰期测定
第十章 蛋白的化学修饰分析
第一节 蛋白磷酸化分析
第二节 蛋白糖基化分析
第三节 其他蛋白共价修饰分析
第十一章 蛋白质的空间结构分析
第一节 蛋白质的一级结构分析
第二节 蛋白质的二级结构分析
第三节 蛋白质的晶体空间结构解析
第四节 蛋白质的液相空间结构解析
第五节 蛋白质空间结构的预测
第六节 蛋白质的分子结构对接
第十二章 蛋白质相互作用研究技术
第一节 酵母双杂交法
第二节 标签融合蛋白结合实验
第三节 免疫共沉淀分析
第四节 物理学方法研究蛋白-蛋白相互作用
第五节 蛋白-蛋白相互作用预测方法
第十三章 蛋白质组学研究相关技术
第一节 蛋白质组双向凝胶电泳-质谱研究技术
第二节 基于多维层析质谱的蛋白质组研究策略
第三节 定量蛋白质组学研究技术
第十四章 基因表达谱分析
第一节 基因表达谱分析的基本方法
第二节 基因芯片的原理及应用
第三节 基因芯片的数据挖掘
第四节 蛋白质芯片的原理及应用
第十五章 基因转录调控分析
第一节 转录调节蛋白与DNA的结合分析
第二节 启动子转录活性分析
第三节 DNA甲基化分析
第四节 芯片技术在基因表达调控研究中的应用
第十六章 非编码RNA研究策略与方法
第一节 miRNA的研究策略及相关技术
第二节 siRNA的设计与应用
第十七章 疾病相关基因的鉴定和分析
第一节 鉴定和分析疾病相关基因的策略
第二节 基因分型
第三节 突变基因的检测
第十八章 遗传修饰动物
第一节 小鼠实验的一般要求
第二节 转基因小鼠
第三节 基因剔除小鼠
第十九章 基因功能的研究策略
第一节 从分子水平研究基因产物的功能特点
第二节 从细胞水平研究基因产物的作用机制
第三节 从整体水平研究基因产物的牛物学效应
附录
附录Ⅰ分子生物学实验设计中的常见错误
附录Ⅱ分子生物学实验微量操作技巧
附录Ⅲ分子生物学实验教学实施方案
附录Ⅳ分子生物学实验资料参考
英中文名词对照索引
第一章 聚合酶链反应
第一节 PCR技术概述
第二节 PCR的引物设计和条件优化
第三节 PCR产物的鉴定方法
第四节 PCR的基本类型及应用
第五节 实时定量PCR
第二章 DNA体外重组
第一节 DNA体外重组的基本流程
第二节 载体的选择及准备
第三节 目的DNA片段的获取
第四节 DNA片段与载体的连接
第五节 重组DNA转化宿丰细胞
第六节 重组DNA的克隆筛选及鉴定
第三章 DNA序列分析技术
第一节 常规DNA序列测定的原理
第二节 自动激光荧光DNA测序――第一代测序技术
第三节 其他DNA序列分析新技术
第四章 基因突变技术
第一节 体外基因突变和鉴定
第二节 细胞和动物的基因诱变和鉴定
第五章 核酸分子杂交
第一节 核酸探针及其标记
第二节 Southem印迹杂交
第三节 Northem印迹杂交
第四节 其他核酸分子杂交
第六章 外源基因在原核细胞的表达
第一节 常用表达系统及其选择
第二节 外源基因的表达和鉴定
第三节 外源基因表达条件和优化
第四节 外源基因原核表达的基本操作
第七章 外源基因在真核细胞中的表达
第一节 真核表达载体及宿主
第二节 真核细胞基因导入方法
第三节 外源基因在酵母细胞中的表达
第四节 外源基因在昆虫细胞中的表达
第五节 外源基因在哺乳动物细胞中的表达
第八章 蛋白质的分离纯化
第一节 蛋白质分离纯化的基本原则
第二节 生物样品的预处理
第三节 蛋白质样品的粗分离
第四节 蛋白质的层析纯化
第五节 蛋白质的电泳分离和鉴定
第六节 纯化蛋白质的后期处理
第七节 蛋白质分离纯化的综合策略
第九章 蛋白质的定性定量分析
第一节 蛋白质分子量的测定
第二节 蛋门质的等电点测定
第三节 蛋白质总含量测定
第四节 特定蛋白质的含量测定
第五节 蛋白质半衰期测定
第十章 蛋白的化学修饰分析
第一节 蛋白磷酸化分析
第二节 蛋白糖基化分析
第三节 其他蛋白共价修饰分析
第十一章 蛋白质的空间结构分析
第一节 蛋白质的一级结构分析
第二节 蛋白质的二级结构分析
第三节 蛋白质的晶体空间结构解析
第四节 蛋白质的液相空间结构解析
第五节 蛋白质空间结构的预测
第六节 蛋白质的分子结构对接
第十二章 蛋白质相互作用研究技术
第一节 酵母双杂交法
第二节 标签融合蛋白结合实验
第三节 免疫共沉淀分析
第四节 物理学方法研究蛋白-蛋白相互作用
第五节 蛋白-蛋白相互作用预测方法
第十三章 蛋白质组学研究相关技术
第一节 蛋白质组双向凝胶电泳-质谱研究技术
第二节 基于多维层析质谱的蛋白质组研究策略
第三节 定量蛋白质组学研究技术
第十四章 基因表达谱分析
第一节 基因表达谱分析的基本方法
第二节 基因芯片的原理及应用
第三节 基因芯片的数据挖掘
第四节 蛋白质芯片的原理及应用
第十五章 基因转录调控分析
第一节 转录调节蛋白与DNA的结合分析
第二节 启动子转录活性分析
第三节 DNA甲基化分析
第四节 芯片技术在基因表达调控研究中的应用
第十六章 非编码RNA研究策略与方法
第一节 miRNA的研究策略及相关技术
第二节 siRNA的设计与应用
第十七章 疾病相关基因的鉴定和分析
第一节 鉴定和分析疾病相关基因的策略
第二节 基因分型
第三节 突变基因的检测
第十八章 遗传修饰动物
第一节 小鼠实验的一般要求
第二节 转基因小鼠
第三节 基因剔除小鼠
第十九章 基因功能的研究策略
第一节 从分子水平研究基因产物的功能特点
第二节 从细胞水平研究基因产物的作用机制
第三节 从整体水平研究基因产物的牛物学效应
附录
附录Ⅰ分子生物学实验设计中的常见错误
附录Ⅱ分子生物学实验微量操作技巧
附录Ⅲ分子生物学实验教学实施方案
附录Ⅳ分子生物学实验资料参考
英中文名词对照索引
医学分子生物学实验技术
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